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大鼠软骨细胞制备时需使用哪些试剂?

发布时间:2022-07-11 点击量:168
  大鼠软骨细胞分离自正常大鼠软骨组织,软骨细胞主要功能:软骨是人身体中不会发生的组织;骨骼在发育初期大部分是由软骨构成的;软骨一般起到承重负荷,减少关节间骨骼摩擦等作用。
  
  前面我们讲述过软骨细胞的制备方法,但是在制备过程所使用的试剂有哪些,这你们知道吗?我相信很多人都是不知道的。下面,欣润生物就来详细讲述一二。
  
  大鼠软骨细胞制备过程中主要的试剂:
  
  1、PBS:每袋加ddH2O定容至1000ml,调pH7.2,高压灭菌消毒。
  
  2、DMEM细胞生长培养液:临用前根据需要加10%胎牛血清,1%的ITS,按1%体积分数加入双抗贮存液(青霉素+链霉素),使青霉素和链霉素的终浓度分别为100U/mL和100U/mL,置于4℃冰箱保存。
  
  3、抗生素:青霉素(80万U)和链霉素(100万U)在无菌操作台内以高压灭菌过的双蒸水溶解(分别加入4ml灭菌水/青霉素,5ml灭菌水/链霉素),配制成20万u/ml分装,置于-20℃冰箱保存,临用时4℃解冻。
  
  注意:尽量避免反复冻融,并使培养基浓度为100u/ml。
  
  4、细胞冻存液:生长培养基(含20%胎牛血清)或100%胎牛血清,加入10%的DMSO混合均匀,置于4℃冰箱保存。
  
  注意:大鼠软骨细胞接种后48H再换液,这样细胞才帖牢不掉。第三、四天多观察,细胞在会爆发式增殖。
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