原代细胞永生化方法（1）使用SV40T基因，诱导细胞不朽化。SV40的T抗原诱导不同类型的细胞不朽化，在许多文献中己证实，此方法为简单且可靠的方法，其机制一直都有详细记载。（2）大多数体细胞的端粒缩短至关键长度 ,就会发生细胞生长障碍或细胞衰老 ;肿瘤细胞因有端粒酶活性而使其具有无限分裂的能力。

原代细胞永生化（Prmary Cells Immortalization）是指体外分离培养的原代细胞经过自发的或受外界因素的影响从增殖衰老危机中逃离，从而具有无限增殖能力的过程。正常组织来源的原代细胞在通常的体外培养条件下可分裂生长，但经过有限次数的传代后，就会停止增殖，发生衰老和死亡。利用基因转染等技术将外源性永生化基因导入目的细胞内，从而建立永生化细胞株。