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小鼠主动脉内皮细胞适用于各种组织的原代培养

发布时间:2020-04-22 点击量:156
  小鼠主动脉内皮细胞是从供体中取得组织或细胞后在体外进行的培养,原代培养不仅是建立各种细胞系的开始,也是从事组织或细胞培养工作人员应熟悉和掌握的基本的技术。
  原代培养的组织或者细胞的生物学特性没有发生很大变化,仍具有二倍体遗传物质,接近和反映体内生长特性,很适合作药物测试、基因表达测试、细胞分化等实验研究。原代培养是获取细胞的主要手段,但原代培养的组织由多种成分组成,比较复杂,即使同一类型细胞如成纤维样细胞或上皮样细胞,细胞间也存在很大差异。如果供体不同,即使组织类型、部位相同,个体差别也可以在细胞上反映出来。
  因而原代细胞的部分生物学特征尚不稳定,如要做较为严格的对比性实验研究,还需要对原代培养的细胞进行短期传代后再进行(需要注意的是有些细胞在传代后可能会发生一些生物学特性的变化)。一般采用2-5代的细胞进行实验。当然特殊情况和一些终端分化细胞如神经细胞、巨噬细胞、心肌细胞除外。小鼠主动脉内皮细胞原代培养的方法很多,基本和常用的为组织块原代培养法和离散细胞原代培养法(消化法)。
  小鼠主动脉内皮细胞培养法是原代细胞培养常用的基本方法,适用于各种组织的原代培养,特别是难以消化的组织,组织块原代培养法操作程序简单,培养前不经过酶液处理,细胞损伤较小。但由于培养过程中细胞移动受到较大限制,完成原代培养所需的时间较长。
   细胞培养的程序一般为:
  1.组织块修整:将组织块用平衡缓冲液反复冲洗,然后在灭菌的培养皿中剪碎至碎块的直径小于1mm。
  2.贴壁:将组织块间隔(小块之间的间隔为1cm)放在培养皿中,培养基需要浸没组织块底部但不能使组织块浮起。
  3.培养:通过生长繁殖,细胞可以从组织块边缘向四周游出,生长繁殖连成片,原组织块可以完全消失。
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