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Calu-1细胞

Calu-1细胞

产品型号:

所属分类:可传代细胞

产品时间:2018-11-27

简要描述:细胞接受后的处理:
1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将15ml离心管置于37℃培养约2-3h。
3)离心弃去15ml离心管中的培养基,细胞沉淀用新鲜的完全培养基重悬并培养。
4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。
5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

详细说明:

    1.                       

本公司的细胞培养操作规程,供参考

一.培养基及培养冻存条件准备:

  1. 准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%
  2. 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%
  3. 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
    • 细胞处理:
  4. 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
  5. 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
  6.  

1.      将培养瓶中细胞轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液。

2.      根据细胞的生长状态,按1:2或以上比例用新鲜培养基重悬细胞,将合适量培养液移入到T-25培养瓶中或T-75培养瓶中培养。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞直接计数后离心,用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

 

注意事项:

1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。



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