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小鼠骨髓内皮祖细胞的鉴定方法

发布时间:2020-06-18 点击量:105
  小鼠骨髓内皮祖细胞来源内皮祖细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。
  成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。
  小鼠骨髓来源内皮祖细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
  小鼠骨髓内皮祖细胞的方法及其鉴定和生物学特性。方法:密度梯度离心法分离获取小鼠骨髓单核细胞,培养于培养液中,每天于倒置显微镜下观察EPC的形态。应用细胞免疫荧光法、流式细胞技术鉴定EPC表面抗原标志CD34、血管内皮生长因子受体,荧光显微镜检测EPC吞噬DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白及结合FITC标记的荆豆凝集素功能。
  注意事项
  1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
  2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
  3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
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