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小鼠破骨细胞培养的污染原因及其预防

更新时间:2022-10-13点击次数:1129
  小鼠破骨细胞进行培养过程中的威胁就是细胞污染,凡是混入细胞培养环境中,对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染。细胞一旦遭到污染,所有的实验结果都会变得毫无意义。因此,及时检测并鉴定出所培养的细胞是否被污染至关重要。
  
  细胞培养实验室要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。细胞培养室要相对封闭,洁净无尘,设有缓冲间。
  
  对实验室进行定期清扫、紫外消毒是避免细胞培养过程中由于实验室环境引起细胞污染的主要措施,此外,实验室内不要放太多杂物,保持实验室干燥,有利于降低因实验室条件引起的细胞污染率。
  
  小鼠破骨细胞培养过程中实验人员是否操作规范,是否严格遵守无菌工作流程,是细胞污染的一个主要因素。操作人员进培养室前,必须先洗手,在缓冲间换穿专用实验服和拖鞋,严禁在实验进行时频繁出入培养室。实验后应将实验产生的废物和废液及时清理出培养室,并清洁无菌工作台。
  
  细菌和真菌污染很容易被检测,因为受到细菌、真菌污染的细胞,培养过程中培养基会出现肉眼可见的明显特征。细菌污染会导致培养基出现浑浊、颜色改变以及pH值急剧变化,受污染的贴壁细胞在几天内会逐渐脱壁死亡。真菌污染后的细胞生长速度变慢,培养基中会漂浮白色、浅黄色或黑色的小点。
  
  因此,通过观察培养基的颜色、漂浮物、pH值或在显微镜下观察小鼠破骨细胞及其生长状态,从而能初步判断该细胞是否受细菌、真菌污染。
  
  也可以使用培养检测法:将细胞培养物在各类培养基中适温培养若干天后,观察是否有细菌或真菌生长。