网站首页新闻动态 > 分离小鼠II型肺泡上皮细胞的知识点,了解一下!

分离小鼠II型肺泡上皮细胞的知识点,了解一下!

发布时间:2022-09-21 点击量:76
  小鼠II型肺泡上皮细胞是肺上皮细胞的重要组成部分,体积小,呈立方体形,覆盖约5%的肺泡表面,占肺泡上皮细胞的60%,占所有肺细胞的14~15%。
  
  具有合成和分泌表面活性物质、参与免疫反应以及转分化等多种功能,在肺发育和损伤修复过程中具有重要作用。
  
  小鼠II型肺泡上皮细胞的分离
  
  雌雄鼠按2:1合笼交配,次日清晨检查雌鼠阴道有无阴栓,有阴栓者确定为妊娠。孕D19(预产期为D22)时,在无菌条件下,剖宫取出胎鼠。
  
  将胎鼠移入超净台,从胸部横断胎鼠,小心取出双肺置于预冷的PBS液中,尽可能除净残留的气管组织和结缔组织等非肺组织,PBS液清洗2~3次,用锋利眼科剪将肺组织剪为1mm3左右大小的组织碎块,用0.25%胰酶(含0.01%DnaseⅠ)溶液清洗1次,然后继续用0.25%胰酶(含0.01%DnaseⅠ)溶液于37℃搅动消化10~20min。
  
  用等量10%FBS的DMEM/F12(*培养基)终止消化,200目筛网过滤后,1500r/min低温离心5min,去上清,收集沉淀,0.1%Ⅰ型胶原酶37℃,5%CO2孵箱内消化10~20min。
  
  终止消化仍用等量含10%FBS的DMEM/F12,1000r/min离心5min,收集细胞沉淀。
  
  原代培养的小鼠II型肺泡上皮细胞体积较大,形态较规则,镜下可见黑色颗粒状特征性的嗜锇小体(即板层体),数量不等,细胞膜上有明显的微绒毛。
QQ在线客服
电话咨询
  • 18014289592