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小鼠心肌细胞具体操作规程是这样的

发布时间:2022-06-23 点击量:160
       小鼠心肌细胞根据其生理功能可分为两类,即工作性心肌细胞和传导性心肌细胞。其中工作性心肌细胞构成心房肌和心室肌,是心壁的主要组成部分,具有兴奋、传导和收缩的功能;而自律性心肌细胞组成心脏的传导系统,包括窦房结、结间束、房室交界、左右束支和普肯耶纤维网。
  小鼠心肌细胞操作规程:
  一.培养基及培养冻存条件准备:
  1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
  2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
  3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
  二.细胞处理:
  1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
  2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
  对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
  方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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